生物顯微鏡的使用方法
導語：對於生物顯微鏡，大家是否會正確使用？下面是小編整理的生物顯微鏡的使用方法，供各位閱讀和借鑑。
一、生物顯微鏡的使用
（一）使用環境與習慣
1、使用環境
顯微鏡的工作場所應當清潔、乾燥、無震動、無腐蝕性氣體存在。
2、工作習慣
（１）檯面和凳子的高度要適當。
（２）鏡檢時，即便用單目顯微鏡，也須兩眼同時睜開，用左眼觀察。以便右眼繪圖或記錄。如一隻眼睜，一隻眼閉，眼睛容易疲勞，無法久看。工作時間較長時，可兩眼輪流觀察。
（二）使用前的準備
1、光學系統的安裝
對新購或已經卸掉光學系統的顯微鏡，使用前必須先將顯微鏡安裝起來。安裝時，為了防止向下掉灰塵，應按照先上後下的順序，即按照目鏡、物鏡、聚光鏡、反射鏡的順序來安裝。圖10-3-1為顯微鏡的安裝圖。箭頭所示為光學元件的安裝位置。
安裝物鏡時，應先將鏡筒升高或載波物臺下降，使轉換器與載物臺之間保持一定的距離。然後，握往物鏡，把它放入轉換器的螺絲口處，先略向反時針方向旋轉，待物鏡配上絲紋後，再按順時針方向旋入，旋至中等程度鬆緊即可。安裝物鏡時，應根據物鏡的放大倍數，從小到大順時針安裝。轉換物鏡時，不要用手推著物鏡旋轉，那樣會使物鏡的光軸歪斜。最好用手捏著轉換器的轉動盤旋轉，或用手扶著與物鏡轉換器銜接處的滾花外圓旋轉。
目鏡和物鏡裝好後，再將聚光鏡插入載物臺下面的聚光器支架內。插入的高度應使聚光器升至最高時，聚光鏡上透鏡的端面稍低於載物臺的平面，以免載玻片與聚光器的鏡頭相碰。然後，將聚光器的固定螺絲旋緊。對非電光源的顯微鏡來說，最後要把反射鏡插入聚光器下面的插孔內。
2、校正光軸
校正光軸的意義在於使物鏡、目鏡、聚光鏡的`主光軸和可變光欄的中心點重合在一條直線上。所以又叫做合軸調節或中心調節。如果光軸歪斜，會使像差增大，解析度和清晰度都要下降。
檢查方法是將可變光欄開至最大，把低倍物鏡旋入光軸，降低鏡筒，使物鏡與載物臺之間的距離小於該物鏡的工作距離（５mm以下）。不放標本，調節反射鏡的角度，使視場最亮；或調節光源燈的亮度，使視場明暗合適。
然後，拔掉目鏡，直接從鏡筒中觀察。一邊把可變光欄慢慢縮小或開啟數次，當光欄關至最小時，光欄的像（此時只有一點點）應正好落在物鏡通光孔的中心。當光欄開大到一定程度時，光欄孔的像應正好與物鏡通光孔的黑圈相重合。若符合上述兩個條件，說明它們“合軸”。否則，就需要調整。
目鏡和物鏡都是固定的，無法進行調整。合軸調節主要是調整聚光鏡的位置。有些顯微鏡聚光器支架兩旁有兩個光軸校正螺絲，調節這兩個螺絲，即可合軸。另一種聚光器是由框架上三個相隔120°的螺絲支援住，其中一個裝有彈簧，可以伸縮；另外兩個螺絲，可以旋動。調整這兩個螺絲，便可合軸。
顯微鏡的光軸校正好後，如果沒有拆下聚光器或其它特殊原因，不必經常校正。
3、準備好標本
準備好高質量的標本備用。
（三）反射鏡、聚光器的使用方法和對光方法
1、調光
對採用反射鏡的的顯微鏡，一般都使用平面反射鏡去反射太陽的散射光。只有在光線不足或窗外有干擾時，才使用凹面反射鏡。
採用電光源的顯微鏡，將光亮調合適即行。
2、聚光器的用法
（１）聚光器高度的調節 一般的聚光鏡，在平行光照射的情況下，其焦點落在它上端透鏡平面中心上方約1.25mm處。當使用高倍鏡或油鏡時，由於放大率大，映象亮度小，需要較強的照明。因此，應把聚光器升至最高，以便使聚光鏡的焦點正好落在標本平面上。但在使用低倍物鏡時，可將聚光器適當下降。
（２）可變光欄的用法 可變光欄起兩個作用。一是控制射向標本的光通量；二是改變聚光器的數值孔徑。在這兩個作用中，後者是主要的。為了使物鏡的解析度得到充分的利用，從原則上說，聚光器的數值孔徑應與物鏡的相同。否則，解析度或清晰度會受影響。
3、對光方法
對電光源顯微鏡來說，使用時，只要將光調節在合適的亮度即行。不需要進行對光。但對使用自然光的低檔顯微鏡來說，要想獲得良好的觀察效果，必須充分利用照明光線。因此，鏡檢之前應先對光。對光時，將低倍鏡旋入光軸，聚光器適當升高，可變光欄開至最大。然後，從目鏡中觀察，同時轉動反射鏡，直至視場最明亮、清晰為止。如果利用自然光，則儘量躲避窗框和窗外樹枝的干擾。
（四）物鏡的正確調焦
對光完成後或調節合適光亮後，升高鏡筒或降低載物臺，將標本玻片夾在移動器即標本夾上，並將欲檢查的部分移至載物臺通光孔的中央，然後開始調焦。
無論作何種檢查，均應從低倍鏡開始。調焦時，先用粗動手輪將鏡筒下降，使低倍鏡的前透鏡與蓋玻片之間的距離略小於該物鏡的工作距離（５mm以下）。為了避免物鏡壓在標本玻片上，可從側面窺視。然後，一邊從目鏡中觀察視野，一邊利用粗動手輪將鏡筒徐徐上升，待初見物像後，改用微動手輪作精細調焦，直至物像最清晰為至。低倍物鏡的視場大，有利於觀察標本的全貌。也可利用移動器或縱、橫向調節手輪尋覓所觀察的目標。如有必要，可將尋得的目標移至視場的中心，為高倍鏡觀察作好準備。
從低倍物鏡轉換為高倍物鏡時，如果物鏡是顯微鏡的原配，所用的載玻片、蓋玻片又符合標準，一般都可以進行“等高轉換”。即轉換後，只要稍微調節一下微調旋鈕，即可看到清晰的影象。但油鏡不強求齊焦，最好先將鏡筒升高後再轉換，最後按低倍鏡的調焦方法重新調焦。
使用油鏡的方法如下：先將鏡筒升高，取下標本玻片，稍稍降低聚光器，並在聚光器的鏡頭上滴兩滴香柏油（油中不應有氣泡。如有，可用小木籤除去），再將標本玻片放回原處，把聚光器升高，使載玻片的底面與香柏油接觸。這樣，就完成了聚光鏡的油浸。接著，在蓋玻片上滴上１滴香柏油。然後從側面窺視，利用粗調使鏡筒儘量下降，直至油鏡的前透鏡浸沒在香柏油中（但尚未接觸玻片），這樣，又完成了物鏡的油浸。然後，一邊從目鏡中觀察，一邊利用微動手輪將鏡筒緩緩上升（注意不要擰錯了方向，壓碎蓋玻片），直至視野中出現最清晰的物像為止。
聚光鏡的油浸，還可以採用另一種滴油方法：即不直接把油滴在聚光器的鏡頭上，而是把載玻片翻過來，將油滴在載玻片的底面上，然後再翻過去，對準放置於聚光器上面，再使聚光器上升，來完成聚光器的油浸。這種方法雖然不那麼順手，但比較安全。有些人使用玻璃棒直接與聚光鏡接觸來塗抹香柏油，這種方法容易劃傷鏡片，不宜採用。
在使用油鏡時，允許在聚光鏡與標本之間不加香柏油，即聚光鏡上仍以空氣為介質，但這會犧牲物鏡的解析度。
如用油鏡觀察後，如又需要轉回高倍物鏡觀察，應將蓋玻片上的油擦去，以免沾汙高倍物鏡。但聚光器上的油可以不擦，只要把光欄適當縮小一點即可。
油鏡使用完畢後，要及時將香柏油擦拭乾淨。鏡頭上可先用乾淨的擦鏡紙擦１～２次，把大部分的油擦掉。然後用二甲苯滴溼的擦鏡紙擦兩次，最後用擦鏡紙擦乾淨即行。聚光鏡的擦拭方法與此相同。如標本需要儲存，玻片上的香柏油可用“拉紙法”擦拭乾淨。即將擦鏡紙覆蓋在玻片上，在紙上滴上一滴二甲苯，趁溼將紙條平拖著往外拉，連續幾次即可擦乾淨。
最後指出：在整個調焦過程中（尤其是高倍物鏡和油鏡的調焦），每個動作都要緩慢進行。否則，物像會一閃而過，找不到觀察的目標。
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